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1.
目的采用酶消化结合组织块培养法对山羊颞下颌关节(temporomandibular joint,TMJ)盘细胞进行体外培养和扩增,探索TMJ关节盘细胞体外培养及扩增的新方法。方法在无菌条件下,切取一月龄山羊TMJ关节盘,剪至1.0mm^3的碎块,用0.25%胰酶、0.01%I型胶原酶消化关节盘组织块,将消化好的组织块置入6孔板中培养。在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化及贴壁率,甲苯胺蓝染色、I型胶原免疫组化染色进行细胞鉴定,测定其生长曲线。结果原代培养的关节盘纤维软骨细胞4天可观察到贴壁细胞,7天贴壁细胞逐渐增多,第10天时细胞彼此相连,铺满平底,细胞以梭形为主,部分多角形。传代后12小时贴壁率达90%,大部分为多角形,4~5天即可长满瓶底。甲苯胺蓝染色可见异染颗粒,胶原免疫纽化染色胞浆内可见棕黄色颗粒。结论酶消化结合组织块培养法培养的山羊TMJ关节盘细胞具有较强的增殖能力,可作为TMJ关节盘组织工程中获取大量原代细胞的实用方法。 相似文献
2.
李天海 《西南民族学院学报(自然科学版)》1997,23(2):167-169
从1996年9月下旬起,会理县鹿厂镇星火村的黑山羊陆续发病,至1996年10月上旬,共发病28只,死亡15只.经临床症状观察、尸体剖解和实验室诊断,结合流行病学分析,确诊为羊肠毒血症.通过及时采取防治措施,控制了该病流行 相似文献
3.
为探究解淀粉芽孢杆菌GSBa-1凝乳酶制备的羊奶干酪(干酪B)成熟特性的变化,以采用商业凝乳酶和同批次羊奶制作的干酪(干酪A)为对照组,比较两组干酪在60d成熟期主要组分、质构特性、微生物指标及风味物质的变化。结果表明,两组干酪得率相差不大。成熟期间干酪的水分、蛋白质及脂肪含量呈先上升后下降趋势,干酪B始终高于干酪A;干酪游离氨基酸总量在成熟期间呈先下降后上升趋势,且干酪B中苯丙氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、丝氨酸含量高于干酪A。成熟前期干酪B质构特性优于干酪A。干酪A成熟后乳酸乳球菌数量增加了(5.22±0.02)%,干酪B无显著变化(P>0.05)。成熟期内,两组干酪中挥发性风味物质种类和含量均增加,但干酪B中的壬酸、辛醇、2-庚酮、2-壬酮、二甲基砜使羊奶干酪风味独特、浓郁。因此,GSBa-1凝乳酶具备替代商业凝乳酶用于羊奶干酪生产的潜力,可对干酪风味的形成和品质的提升起到一定促进作用。 相似文献
4.
5.
对34只引入青海的辽宁绒山羊3个双极胸导联心电图进行了描记和分析。结果发现:①在3个双极胸导联心电图上,P波和T波的波向变化甚大;②在CⅡ和CⅢ导联心电图上,QRS综合波多数呈qR型(分别为94.2%和79.5%),而在CI导联心电图上,QRS综合波呈现9种波型;③各波和间期的时限(s)为:P坡,0.049;P—Q间期,0.107;QRS综合波,0.059;T波,0.072;Q—T间期,0.306;Q—Tc间期,0.373;R—R间期,0.672;④被检山羊窦律不齐的发生率达64.71%。 相似文献
6.
将28只摘除卵巢后6~7周的山羊随机分为4组,按2×2因子实验设计进行处理,实验因子为:①肌肉注射孕酮(P_4):1~5天每天10mg;6~12天每天20mg.②肌肉注射雌二醇(E_2):第13天20ug;第14天40ug.对照处理则注射相应体积的玉米油,在第1~15天每天采1次颈静脉血样,用RIA法测定血浆P_4和E_2水平,结果表明,每天注射10和20mgP_4可使血浆P_4水平分别维持在3和5ng/ml左右,注射20和40μgE_2可分别产生30和50pg/ml的血浆E_2水平。用这种方法,简便而准确地模拟了山羊发情周期中血浆P_4和E_2水平的变化范型。 相似文献
7.
山羊精子电穿孔转染外源DNA影响因素及最适条件的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文以山羊精子为材料用电穿孔导入法转染外源基因,为生产转基因山羊奠定基础。用血细胞计数器在显微镜下记数死亡精子数检测精子活力,并用原位杂交实验检测电击精子消化前、后阳性率,以探讨山羊精子电穿孔转染外源DNA的方法及影响因素,摸索并优化电穿孔转染程序和条件。结果显示:电穿孔导入法可用于山羊精子介导转染外源DNA;电场强度、电击时间和电击次数同时影响精子活力,其中电击时间显著影响外源DNA的内化转运(P<0.05),山羊精子最适电穿孔条件为400V、200μs、电击1次,该条件下电击后精子活力和消化前、后阳性率分别为0.45和27.6%、22.5%;最适电穿孔条件下电击洗涤精子比未洗涤精子的消化后阳性率提高14%(P<0.01),将洗涤精子与外源DNA共孵育后再电击比不孵育处理组的消化后阳性率提高5.8%(P>0.05);电穿孔处理消化后阳性率在个体间无显著差异,且电击转染的精子被内化转运到精细胞内的外源DNA分布不规则。结果表明,山羊精子电穿孔转染外源DNA的最适转染条件为对精子充分离心洗涤并与外源DNA共孵育后,在400V/200μs条件下电击1次。 相似文献
8.
乐至型川中黑山羊具有常年发情、产羔率高等优良繁殖特性,但是在极端气候条件下(炎热夏天和寒冷冬天)产的羔羊成活率低,因此,本研究拟建立同期发情率高、受胎率高和产羔率高的山羊同期发情方法以调整产羔季节.研究选取健康黑山羊63只,随机分为A、B、C三个组.在同一时间给每只羊放置CIDR阴道栓,处理13天后撤栓,同时注射PGF_(2α),然后注射不同剂量的PMSG:A组(n=20)不注射,B组(n=20)300IU,C组(n=23)500IU.母羊发情后用公羊自然交配;观测到母羊发情后,颈静脉采血制备血浆,用ELISA法测定血浆生殖激素(FSH、LH、E_2和P_4)浓度.结果发现,撤栓后72h内A、B、C三个组的发情率分别为80.0%、100.0%和82.6%,受胎率分别为68.8%、90.0%和78.9%,产羔率分别为190.9%、238.9%和206.7%.各组间生殖激素(FSH、LH、E_2和P_4)浓度差异不显著.综上所述,本试验优化出乐至黑山羊同期发情方法,即CIDR处理13天,撤栓后肌肉注射PGF_(2α)及300IU的PMSG. 相似文献
9.
用大体解剖和组织切片方法观察研究了不同饲养条件下9只1.5岁的阿尔巴斯绒山羊在不同饲养条件下瓣胃帆的形态学变化.研究结果表明:瓣胃帆的粘膜是介于前胃黏膜与真胃黏膜之间的过度结构.三种不同饲养条件下,阿尔巴斯绒山羊左右瓣胃帆的大小差异(除干草组与青草组外)不显著.瓣胃帆下面的粘膜固有层内分布有管状的贲门腺,腺细胞内夹有少量的壁细胞.瓣胃帆粘膜的固有层和粘膜下层内有发达的淋巴小结. 相似文献
10.
选用10个SSR标记,经PCR扩增、9%非变性聚丙烯酰胺电泳和银染法显色,对高原型藏山羊、山谷型藏山羊进行遗传多态性研究,并以白玉黑山羊、建昌黑山羊、美姑山羊和新疆山羊作对照.结果表明,10个SSR标记在高原型藏山羊、山谷型藏山羊、白玉黑山羊、建昌黑山羊、美姑山羊和新疆山羊群体的平均H、PIC、Ne分别为0.673/0.631/4.3、0.680/0.649/4.7、0.777/0.660/4.3、0.797/0.716/5.1、0.793/0.561/3.2和0.680/0.629/4.6.高原型藏山羊与山谷型藏山羊(D=0.063)聚为1类;建昌黑山羊和美姑山羊(D=0.026)聚为1类后,再与白玉黑山羊聚为1类;最后两类与新疆山羊聚为1大类,与各群体的来源和生态地理分布一致. 相似文献